นักผจญภัยและนักโบราณคดีอย่าง อินเดียน่า โจนส์ (นำแสดงโดยแฮร์ริสัน ฟอร์ด) ได้พบแผนที่ขุมทรัพย์ที่นำทางไปหาจอกศักดิ์สิทธิ์ตามความเชื่อของพ่อ เฮนรี่ โจนส์ (นำแสดงโดยฌอน คอนเนอรี) ว่าวิหารและสิ่งมหัศจรรย์มีอยู่จริง ขณะที่เขาต้องเผชิญกับนักล่าสมบัติและทหารรับจ้างของนาซีที่ตามหาขุมทรัพย์สิ่งเดียวกันนี้